रासायनिक यौगिकों के मिश्रण को अलग करने और शुद्ध करने के लिए कॉलम क्रोमैटोग्राफी एक व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली विधि है। कॉलम क्रोमैटोग्राफी के उपकरण में कई प्रमुख घटक शामिल होते हैं जो प्रभावी पृथक्करण सुनिश्चित करते हैं। यहां उपकरण का एक सिंहावलोकन दिया गया है:
1. स्तम्भ
सामग्री:आमतौर पर कांच, स्टेनलेस स्टील या प्लास्टिक से बना होता है।
आकार:क्रोमैटोग्राफी (विश्लेषणात्मक, प्रारंभिक या औद्योगिक) के पैमाने के आधार पर भिन्न होता है।
से भरे:स्थिर चरण (उदाहरण के लिए, सिलिका जेल, एल्यूमिना, या राल)।
फ्रिट या फ़िल्टर:स्थिर चरण को मोबाइल चरण के साथ कॉलम से बाहर निकलने से रोकता है।
2. स्थिर चरण
संघटन:विशिष्ट अवशोषक गुणों वाला ठोस पदार्थ।
प्रकार:सिलिका जेल, एल्यूमिना, या कार्यात्मक रेजिन (उदाहरण के लिए, आयन-एक्सचेंज या आत्मीयता सामग्री)।
3. मोबाइल चरण
विलायक या विलायक मिश्रण:स्थिर चरण के माध्यम से नमूना ले जाता है।
प्रकार:गैर-ध्रुवीय (उदाहरण के लिए, हेक्सेन), ध्रुवीय (उदाहरण के लिए, मेथनॉल, पानी), या ध्रुवीयता का एक ग्रेडिएंट।
4. नमूना इंजेक्टर
नमूना मिश्रण को कॉलम पर पेश करने के लिए उपयोग किया जाता है।
सटीक नियंत्रण के लिए मैन्युअल इंजेक्शन या स्वचालित प्रणाली हो सकती है।
5. पंप (वैकल्पिक)
मोबाइल चरण का निरंतर प्रवाह सुनिश्चित करता है।
उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) में या जब प्रवाह के सटीक नियंत्रण की आवश्यकता होती है तो उपयोग किया जाता है।
6. डिटेक्टर (वैकल्पिक)
वास्तविक समय में अलग-अलग घटकों की पहचान और मात्रा निर्धारित करता है क्योंकि वे कॉलम से निकलते हैं।
उदाहरणों में शामिल हैं:
यूवी-विज़ स्पेक्ट्रोफोटोमीटर
प्रतिदीप्ति डिटेक्टर
मास स्पेक्ट्रोमीटर (एमएस)
अपवर्तक सूचकांक (आरआई) डिटेक्टर
7. अंश संग्राहक
जैसे ही वे स्तंभ से निकलते हैं, यौगिकों के अलग-अलग अंशों को एकत्रित करता है।
इसमें समय या डिटेक्टर सिग्नल के आधार पर स्वचालित संग्रह शामिल हो सकता है।
8. डेटा अधिग्रहण प्रणाली (वैकल्पिक)
डिटेक्टर से डेटा रिकॉर्ड और विश्लेषण करता है।
क्रोमैटोग्राम उत्पन्न करता है जो पृथक्करण प्रक्रिया को प्रदर्शित करता है।
9. सहायक उपकरण
दबाव नियामक:अत्यधिक दबाव डालने से रोकें.
थर्मोस्टैट या हीटर:यदि आवश्यक हो तो कॉलम तापमान को नियंत्रित करें।
वाल्व:मोबाइल चरण और नमूने के प्रवाह को प्रबंधित करें।
सरल सेटअप (उदाहरण के लिए, गुरुत्वाकर्षण-आधारित कॉलम क्रोमैटोग्राफी) के लिए, पंप, डिटेक्टर और स्वचालित सिस्टम आवश्यक नहीं हो सकते हैं। इसके बजाय, गुरुत्वाकर्षण या कम दबाव वाली प्रणालियाँ मोबाइल चरण को स्थिर चरण के माध्यम से चलाती हैं।
